Для создания пассивного иммунитета вводят иммуноглобулины

Отзывы

1.2. Препараты для создания пассивного иммунитета

Пассивный искусственный иммунитет
получают при вве­дении в организм
человека готовых антител в виде
сыворо­ток, иммуноглобулиновых
фракций, полученных от активно
иммунизированных животных или доноров,
а также лиц, перенесших соответствующие
инфекции в клинически выра­женной
или субклинической форме. Ориентиром
для получе­ния таких препаратов служат
высокие титры специфических антител у
предполагаемых доноров.

Поскольку сывороточные препараты
содержат готовые антитела, способные
нейтрализовать действие патогенных
возбудителей и ядовитых продуктов их
жизнедеятельности, они позволяют
создавать иммунитет в максимально
сжатые сроки, что, особенно важно при
экстренной профилактике заболеваний
с коротким инкубационным периодом и в
лече­нии уже развивающейся болезни.

По направленности действия
лечебно-профилактические сывороточные
препараты можно разделить на две
группы— антитоксические и
антибактериальные.

1.2.2. Антибактериальные сыворотки

а) видимые:
иммобилизация; иммунного прилипания;
лизиса (в том числе гемолиза);

прямой и
непрямой.

Реакция
иммунофлюоресценции
— РИФ (метод Кунса).Различают три
разновидности метода прямой, непрямой,
с комплементом. Реакция Кунса является
методом экспресс-диагностики для
выявления антигенов микробов или
определения антител.

Прямой
метод РИФ
основан на том, что антигены тканей или
микробы, обработанные иммунными
сыворотками с антителами, меченными
флюорохромами, способны светиться в
УФ-лучах люминесцентного микроскопа.
Бактерии в мазке, обработанные такой
люминесцирующей сывороткой, светятся
по периферии клетки в виде каймы зеленого
цвета.

Непрямой
метод РИФ
заключается в выявлении комплекса
антиген — антитело с помощью

антиглобулиновой
(против антитела) сыворотки, меченной
флюорохромом. Для этого мазки из взвеси
микробов обрабатывают антителами
антимикробной кроличьей диагностической
сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся
антигенами микробов, отмывают, а
оставшиеся на микробах антитела выявляют,
обрабатывая мазок антиглобулиновой
(антикроличьей) сывороткой, меченной

флюорохромами. В
результате образуется комплекс микроб
антимикробные кроличьи антитела
антикроличьи антитела, меченные
флюорохромом. Этот комплекс наблюдают
в люминесцентном

микроскопе, как и
при прямом методе.

Анибактериальные сыворотки, широко
применявшиеся с лечебной целью до
внедрения химиотерапии, в настоящее
время почти не используются. Действующим
началом антибактериальных сывороток
служит комплекс антител, усиливающих
фагоцитоз (опсокины) и процессы комплемент
зависимого лизиса бактерий. В настоящее
время из антибактериальных сывороток
используют только один препарат
противосибириязвенный иммуноглобулин.

По типу реакций, в которых они используются
диагностические сыворотки делят на
агглютинирующие, преципитирующие, —
гемолитические, противовирусные и пр.

Общий принцип их приготовления
—гипериммунизацая животных (обычно
кроликов) соответствующимиантигенами.

Для создания пассивного иммунитета вводят иммуноглобулины

Агглютинирующие сыворотки. Цельные
нёистощенные сыворотки содержат антитела
ко всем антигенам данного микроба-видовым
и групповым. Их применяют для реакции
в пробирках, где сыворотка должна быть
разведена до титра, указанного на
этикетке ампулы. Титром алютинирующей
сыворотки называют максимальное
разведение, в котором она еще способна
агглютинировать культуру, использованную
для иммунизации.

В низких разведениях
реакция может быть неспецифической за
счет наличия антител к антигенам, общим
для разных, групп бактерий. Из таких
сывороток можно приготовить,адсорбированные
(истощенные) сыворотки путем связывания
«ненужных» антител соответствующими
антигенами. Такие сыворотки часто
называтют моноспецифическими,
монорецепторными. и применяют только
в одном рабочем разведении для реакции
агглютинации на стекле.

Например, специфическая, брюшнотифозная
О-сыворотка содержит антитела к
0-антигенам NN9, 12. Отдельно
готовят сыворотки к Н-антигену. Для
приготовления Н-сыворотки, иммунизацию
животного, проводят живой культурой
хорошо сформированными жгутиками и
удаляют О-антитела при помощи сорбции
взвесью гретых бактерий. Бактерии-адсорбенты
удаляют из сыворотки путем центрифугирования
фильтрования.

Прецитирующие сыворотки—применяют
для обнаружения антитена в экстракте
и исследуемого материала (кожа, моча, и
т. д.). Обычно используют в неразведенном
виде. Титр преципитирующей сыворотки
определяется по максимальному разведению
антигена с которым наблюдается
положительная реакция. Преципитацию
проводят в живой среде (кольцепреципитации),
либо в геле (реакция иммунодиффузии по
Оухтерлони, иммуноэлектрофорез).

Гемолитические сыворотки— готовят
путем гипериммунизации кроликов взвесью
чужеродных эритроцитов. В практике
микробиологических исследований
используют гемолитическую сыворотку
к эритроцитам барана для остановки
реакции связывания комплемента.

Нейтрализующие сыворотки
—их применение основано на
специфической нейтрализации бактериальных
токсинов и биологической активности
вирусов (цитопатический эффект, гибель
животных, реакции гемагглютинации,
гемадсорбции).

Иммунофлюоресцирующие сыворотки
—применяют при экспресс-диагностике
с целью быстрого обнаружения бактерий
и вирусов в исследуемом материале.
Используют два варианта реакции (по
Кунсу): а) прямой метод одноэтапная
обработка материала специфической
рудной сывороткой меченной флюорохромом
(изоцианат флюрооресцеина);

Для создания пассивного иммунитета вводят иммуноглобулины

б) непрямой
(двухэтапный) метод—
последовательная обработка
специфической (диагностической)
немеченной сывороткой (первый этап) и
флюоресстирующей сывороткой, содержащей
меченные антитела против видовых
глобулинов диагностической сыворотки
(второй этап). Например, при дизентерии
на первом этапе мазок из испражнений
больного обрабатывают специфичекой
диагностической сывороткой во влажной
камере, при температуре 370С в
течение20—30мин, затем
препарат предварительно промывают от
избытка антител.

В клинике — эти методы особенно полезны
для индикации микоплазм и вирусов,
выделение и, изучение которых, традиционными
микробиологическими приёмами представляет
значительные технические трудности

2.1. Гнойно-септические инфекции

К гнойно-сеитическим заболеваниям
относят острые и хронические воспалительные
процессы очагового (пневмония,
пиелонефрнт, пиодермия и пр.) и системного
характера (сепсис), которые вызываются
условнопатогенными бакте­риями—стафилококк,
стрептококк, пневмококк, синегнойная
палочка, представители энтеробактерий,
палочка инфлюенпы, бактероиды и др. В
настоящее время лишь для немно­гих
из них разработаны стандартные
биологические пре­параты.

2.1.1. Стафилококк

Нативный стафилококковый анатоксин
— экзотоксин стандартного токсигенного
штамма стафилокок­ка «ВУД», обезвреженный
0,4%формалином в течение
10 суток при 37°С.

Очищенный адсорбированный стафилокок­ковый
анатоксин—получают из
нативного анатоксина осаждением
трихлоруксусной кислотой с последующей
сорб­цией действующего начала
гидроокисью алюминия. При­меняют для
лечения стафилококковых заболеваний,
а также с целью профилактики гнойной
хирургической инфекции.

Стафилококковая вакцина —инактивированная взвесь
10—12штаммов патогенных стафилококков,
получен­ных от больных со стафилококковыми
поражениями кожи. Применяют для лечения
фурункулеза, пиодермии, абсцес­сов,
флегмон.

Антифагин стафилококковый
—термостабиль­ный стафилококковый
антиген с антифагоцитарной .актив­ностью,
получают из 10—12штаммов
золотистого стафило­кокка. Применяют
подкожно при фурункулезе, гидро­аденитах.

Антистафилококковый иммуноглобулин
— готовят из плацентарной крови
рожениц и крови доноров, иммунизированных
стафилококковым анатоксином.

Ант и стафилококковая плазма
—получают пу­тем иммунизации
доноров стафилококковым анатоксином.
Выпускают в двух формах—жидкая
(в замороженном со­стоянии) и сухая
(лиофилизированная).

Бактериофаг стафилококковый
—препарат, активный в отношении
штаммов стафилококков различного
происхождения—с ожоговой
и раневой поверхностей, из крови, желчи,
остеомиелитных свищей, из носоглотки
боль­ных ангинами и бактерионосителей.

Адаптированные фаги —см. 1.3.

Международный набор стафилококковых
фагов—применяют для
фаготипнрования штаммов золо­тистого
стафилококка.

2.1.2. Стрептококк

Для создания пассивного иммунитета вводят иммуноглобулины

Бактериофаг стрептококковый
—препарат ак­тивный в отношении
штаммов стрептококка различного
про­исхождения. Применяют для лечения
и профилактики кож­ных, хирургических
стрептококковых инфекций, при ангине,
скарлатине.

Адаптированные фаги—см.
1.3.

Для типирования стрептококков предложен
набор диаг­ностических сывороток к
групповым (С) и типовым (М, Т) антигенам.
В настоящее время эти сыворотки
апробируются и научных учреждениях
Советского Союза.

2.7.5.Кишечные палочки, протей

Бактериофаг коли —препарат активный в отноше­нии наиболее
распространенных серологических групп
энтеропатогенных кишечных палочек.
Применяют с профилактической и лечебной
целью.

Бактериофаг коли — протейный
—смесь бакте­риофагов активных
в отношении наиболее распространен­ных
серологических групп энтеропатогенных
кишечных палочек (О111, О55,
О 44,О20/145, О 26,O124,O125)
и протея (P.mi-rabilis,P.vulgaris).

Бактериофаг применяют для лечения
детей, больных ки­шечными заболеваниями,
обусловленными энтеропатогенными
кишечными палочками и протеем.

Бактериофаг протейный —смесь фаголизатов, активных в отношении
Р.mirabilis,P.vulgaris. Применяют с лечебной
и профилактической целью.

Адаптированные фаги-—см.
1.3.

Диагностические сыворотки
-см. 2.4.

2.2. Брюшной тиф, парагифы а и в

Брюшнотифозная спиртовая сухая вакци­на,
обогащенная Vi-антигеном—содержит
возбудите­лей брюшного тифа,
обезвреженных этиловым спиртом и
высушенных из замороженного состояния
в вакууме. В ка­честве растворителя
прилагают химическую вакцину—Vi-антиген
брюшнотифозных бактерий.

Тифопаратифозно -столбнячная химиче­ская сорбированная
вакцина (TAB(te)).
Содер­жит 0-антигены брюшнотифозного
(Т) и паратифозных А и В микробов и
столбнячный анатоксин (te).
Антигены сорбированы на гидрате окиси
алюминия.

Состав вакцины можно менять в соответствии
с эпидеми­ческой обстановкой: вакцина
полного состава TAB(te),
пре­парат без паратифозных А и В
компонентовT(te),
препарат без столбнячного анатоксина—TAB.

Бактериофаг сальмонеллезный
—полива­лентный, смесь фаголизатов
сальмонелл групп А, В, С, Д, Е. Применяют
для лечения детей и взрослых больных
сальмонеллезами, санации носителей
сальмонелл, а также с про­филактической
целью по эпидемическим показателям на
предприятиях мясоперерабатывающей
промышленности.

Бактериофаг брюшнотифозный жидкий или
сухой — смесь бактериофагов,
активных в отношении возбу­дителей
брюшного тифа различных фаготипов.
Препарат применяют для предупреждения
заболеваний брюшным ти­фом в
эпидемических очагах.

а) агглютинирующая адсорбированная
поливалентная сальмонеллезная 0-сыворотка
(групп А, В, С, Д, Е);

б) агглютинирующая адсорбированная
поливалентная сальмонеллезная 0-сыворотка
редких групп;

в) агглютинирующие адсорбированные
сальмонеллезные 0-сыворотки к рецепторам
1,2… и т. д.;

г) агглютинирующие адсорбированные
сальмонеллезные Н-сыворотки к рецепторам
а, в, с… и т. д.;

д) агглютинирующая адсорбированная
сальмонеллезная ОН-сыворотка;

е) агглютинирующие неадсорбировалные
паратифозные сыворотки, (А и В) и к
наиболее часто встречающимся воз­будителям
пищевых отравлений (сальмонеллы
тифимуриум, холерасуис, Ньюпорт,
энтеритидис, анатум);

ж) агглютинирующир и сухие сыворотки
«О»для иденти­фикации бактерий
рода «Аризона».

Диагностикумы: 1)убитые
культуры сальмонелл, богатые тем или
иным антигеном (0—9,Н—dи др. ОН-диагностикумы) используют для
обнаружения антител к сал-монеллам
(серодиагностика); 2)РНГА-диагностикум — для
определения антител к
Vi-антигену.

2.4. Эшерихиозы

а) набор агглютинирующих поливалентных
ОВ-коли сывороток, содержащих смесь к
различным О- и В-антигенам (О26-О111,
Оl45и Др.).

б) адсорбированные OB—
коли сыворотки, содержащие антитела к
отдельным ОВ-серогруппам;

в) сыворотки, содержащие антитела к
Н-антигенам для определения серотипа
(серовара) эшерихий. —

Перечисленные сыворотки используют в
реакции агглю­тинации на стекле-колонии
с чашек и в реакции разверну­той
агглютинации (с гретыми и негретыми
бактериальными’ взвесями).

Бактериофаг коли —протейный (см. 2.1.5.).

2.5. Холера.

Холерная вакцина представляет взвесь
холерных и Эль-Тор вибрионов Огава и
Инаба, убитых нагреванием и формалином.
Выпускают в сухом и жидком виде. Вводят
подкожно. Эффективность
40—50%в первые 3месяца
после вакцинации, затем снижается.

Холероген-анатоксин испытывается для
массово­го применения, так как в
патогенезе холеры ведущую роль играет
экзотоксин вибриона—холероген.

Агглютинирующие диагностические
сыво­ротки используют для идентификации
вибрионов. Приме­няют поливалентную
0-сыворотку и адсорбированные 0-сыворотки
Инаба и Огава (для ориентировочной
реакции агглютинации на стекле и
развернутой реакции агглю­тинации).

Диагностические бактериофаги используют
для идентификации классических холерных
вибрионов и
вибрионов Эль-Тор.

2.7. Коклюш

АКД С-вакцина—используют
для плановых приви­вок см.
2.6.

Коклюшная моновакцина —готовят из коклюшных бактерий убитых
формалином или мертиояатом (препарат
ртути, мало повреждающий антигенную
структуру микроба). Используют только
по эпидемическим показаниям вочагах
коклюшной инфекции.

Иммуноглобулин нормальный
человеческий—применяют
для создания пассивного иммунитета
против коклюша у детей, бывших в контакте
с больным коклюшем.

2.8. Туберкулез

Вакцина Б Ц Ж—представляет
собой взвесь живых лиофилизированных
микобактерий вакцинного штамма (штамм
.Кальметта и Герена). Вакцинный штамм
получен путем длительного (в течение
13лет) выращивания туберку­лезных
микобактерий бычьего вида в неблагоприятных
условиях на картофельно-глицериновой
среде с добавлением желчи.

Вакцинацию
проводят в период новорожденноста (на
5—7день жизни), когда организм
свободен от микобактериальной инфекции.
Ревакцинации подлежат все здоровые
дети, подростки и взрослые до
30лет, отрицательно реагирующие на
туберкулин. Механизм иммунитета при
ту­беркулезе полностью не раскрыт. В
клинической практике основным критерием
напряженности вакцинального иммуни­тета
служит переход отрицательной кожной
реакции на ту­беркулин в положительную.

Туберкулин— концентрированный
фильтрат двухме­сячной бульонной
культуры туберкулезных бактерий,
инактнвированный при 120°.

1.Альттуберкулин
Коха-неочищенный фильтрат, исполь­зуют
только для накожных проб (проба Пирке),

2.Туберкулин ППД (Purificatumproteinosumderivatum)
очищенный туберкулин, состоящий в
основном из пептидов-дериватов белка.

Туберкулин ППД-Л—очищенный
туберкулин в модифика­ции Линниковой.

Очищенные препараты применяют для
внутрикожной ди­агностической пробы
(проба Манту).

2.11. Столбняк

Адсорбированный столбнячный анатоксин
—применяют для создания
активного искусственного имму­нитета.
Детей, иммунизируют комплексными
препаратами, включающими, кроме
столбнячного анатоксина дифтерий­ный
и коклюшный компоненты (АКДС-вакцина
— см. 2.6.).

Столбнячный анатоксин входит в состав
ассоциированно­го препарата TAB(te) -вакцины
(см. 2.2.),которую используют
по эпидемическим показаниям.,

При ранениях или хиругических
вмешательствах, свя­занных с тяжелой
травмой, препараты столбнячного
анаток­сина применяют с противостолбнячной
антитоксической сы­вороткой (экстренная
активно-пассивная профилактика
столбняка).

Противостолбнячная антитоксическая
сы­воротка —очищенная
и концентрированная методом «Диаферм-3»,
Применяют для создания пассивного
иммуни­тета при ранениях и для лечения
развивающейся столбняч­ной инфекции.

Для предупреждения анафилаксии сыворотку
вводят дробно, после отрицательной
внутрикожной пробы с лоша­диной
сывороткой. С профилактической целью
делают под­кожные инъекции, при лечении
сыворотку вводят внутримы­шечно,
внутривенно, в спинно-мозговой канал.

2.12. Газовая анаэробная инфекция

Противогангренозные моно- и поливалент­ные
сыворотки—получают путем
иммунизации лоша­дей анатоксинами:Cl.perfringens,Cl.oedematiens,Cl.septicum.
Применяют: а) с лечебной целью—при
газовой ин­фекции, в случаях послеродового
анаеробного сепсиса и др.; б) для
профилактики при тяжелых травмах,
связанных с размозжением мышечной
ткани; в) с диагностической целью для
определения вида возбудителей в опытах
нейтрализации токсина на мышах.

2.13. Ботулизм

Противоботулиновые антитоксические
сы­воротки —лечебные
препараты, представляющие собой
единственно надежное средство при
лечении ботулизма. Вы­пускают
поливалентные и моновалентные сыворотки
против токсинов типа А, В, Е, играющих
основную роль в патоло­гии человека.
Получают путем иммунизации лошадей
боту-линовыми анатоксинами. Типовые
ботулиновые сыворотки используют в
опытах нейтрализации токсина на мышах
при микробиологической диагностике
ботулизма.

Механизмы развития аир

  1. Незначительное
    повреждение аутоантигенов (при вирусной
    инфекции).

  2. Иммунный ответ
    на перекрестно-реагирующие антигены
    (особенно при хронических инфекциях с
    длительной персистенцией возбудителя).

  3. Связывание
    чужеродного антигена клетками организма
    и превращение их в носителей чужеродных
    эпитопов.

  4. Высвобождение
    при острой травме эндоантигенов, в
    норме изолированных от иммунной системы
    ГЭБом.

  5. Поликлональная
    активация ИКК митогенами.

  6. Расстройство
    регуляции иммунной системы (недостаточность
    супрессорной функции, атипичная
    экспрессия MHC-II
    на тех клетках, на которых в норме этих
    антигенов нет — например, при аутоиммунном
    тиреоидите).

Аутоиммунные
заболевания:

  1. Генерализованные
    — возникают из-за образования антител
    к антигенам, общим для нескольких
    органов и тканей — системная красная
    волчанка, прогрессирующий системный
    склероз, ревматоидный артрит и др.

  2. Органо- и
    тканеспецифические — характеризуются
    аутоиммунным ответом на антиген,
    присутствующий только в определенном
    типе клеток.

Аутоиммунные
болезни

  • крови и кроветворной
    системы (гемолитическая анемия,
    тромбоцитопения, пернициозная анемия,
    нарушение свертываемости крови);

  • печени (хронический
    гепатит, цирроз);

  • эндокринных желез
    (тиреоидит Хашимото, сахарный диабет);

  • нервной системы
    (энцефалит);

  • желудочно-кишечного
    тракта (язвенный колит).

Критерии
аутоиммунной природы заболевания:

  • наличие в крови
    аутоантител;

  • наличие
    сенсибилизированных лимфоцитов;

  • наличие аутоантигенов;

  • возможность
    пассивной передачи сенсибилизации к
    данному антигену с помощью сыворотки
    или лимфоцитов;

  • экспериментальное
    воспроизведение сенсибилизации к
    данному антигену;

  • сходство клинической
    картины естественного и экспериментального
    иммунного процесса.

Основные
механизмы отмены толерантности и
развития аутоиммунных реакций

1.
Изменения химической структуры
аутоантигенов (например- изменение
нормальной структуры антигенов клеточных
мембран при вирусных инфекциях, появление
ожоговых антигенов).

2.
Отмена толерантности на перекрестно-
реагирующие антигены микроорганизмов
и эпитопы аутоантигена.

3.
Появление новых антигенных детерминант
в результате связывания чужеродных
антигенных детерминант с клетками
хозяина.

4.
Нарушение гисто- гематических барьеров.

5.
Действие суперантигенов.

6. Нарушения
регуляции иммунной системы ( уменьшение
количества или функциональная
недостаточность супрессирующих
лимфоцитов, экспрессия молекул МНС
класса 2 на клетках, в норме их не
экспрессирующих- тиреоциты при
аутоиммунном тиреоидите).

Реакция
агглютинации (от лат. agglutinatio
— склеивание) — склеивание корпускул
(бактерий, эритроцитов и др.) антителами
в присутствии электролитов — натрия
хлорида.

Реакция агглютинации
проявляется в виде хлопьев или осадка,
состоящих из корпускул (например,

бактерий), «склеенных»
антителами.

РА используют для:
Определения возбудителя, Определения
антител в сыворотке крови больного

Реакция агглютинации
на стекле. К капле агглютинирующей
сыворотки (разведение 1 : 20) добавляют
взвесь бактерии, выделенных от больного.
Образуется хлопьевидный осадок.

Развернутая реакция
агглютинации с сывороткой крови. К
разведениям сыворотки добавляют
диагностикум.

прямая: пластинчатая;
объемная;

непрамая:
латекс-агглютинация; ко-агглютинация;
реакция непрямой гемагглютинации
(РНГА) = пассивной гемагглютинации
(РПГА).

58. Иммунодефицитные состояния. Классификация. Клинические проявления. Характеристика иммунодефицитов. (л №16)

Иммунная
система обладает особыми физиологическими
механизмами функционирования
(распознавание антигена, активация
иммунокомпетентных клеток, их пролиферация,
дифференцировка и иммунорегуляция).
Если в одном или нескольких звеньях
иммунной системы возникают дефекты,
это приводит к иммунодефицитным
состояниям.

По
происхождению
различают первичные
(генетически обусловленные) и вторичные
(возникающие
в связи с инфекциями, инвазиями, опухолями,
старением, ожогами, травмами и др.)
иммунодефициты.


иммунодефициты, обусловленные
преимущественным поражением В- звена;


иммунодефициты, обусловленные
преимущественным поражением Т- звена;


комбинированные иммунодефициты.

Различают
также гуморальные
(самые
частые), клеточные
и клеточно- гуморальные
иммунодефициты.

Дефицит
лимфоцитов, макрофагов, плазмацитов,
гранулоцитов — это клеточная
форма иммунодефицита.
Дефицит иммуноглобулинов (антител) —
это гуморальный иммунодефицит.


инфекционный
синдром
(гнойно- септические процессы связаны
с нарушениями преимущественно гуморального
иммунитета, оппортунистические вирусные,
грибковые и протозойные заболевания —
с дефектами клеточного иммунитета);


желудочно-
кишечные расстройства
(нарушения всасывания, дефицит IgA,
инфекции желудочно- кишечного тракта);


опухоли иммунной системы;


аллергический и аутоиммунный синдромы
(атопии,
аутоиммунные гемолитические анемии);


частое сочетание с пороками развития
(при
врожденных иммунодефицитах);

  • гематологические
    изменения
    (снижение
    количества лимфоцитов и нейтрофилов,
    эозинофилия, анемия, тромбоцитопения).

Наиболее
часто выделяют иммунодефициты,
обусловленные: — нарушениями гуморального
звена иммунитета (гипо- и агаммаглобулинемии
и др.; — нарушениями функций тимуса и
клеточного иммунитета; — нарушениями в
системе фагоцитоза; — дефектами системы
комплемента; — тяжелыми комбинированными
нарушениями.

В основе первичных
(врожденных) иммунодефицитов
— генетический дефект, который может
реализоваться на разных стадиях развития
иммунокомпетентных клеток — стволовой
клетки, этапах дифференциации Т- и В-
клеток, при созревании плазматических
клеток.

Спектр
хромосомных дефектов иммунитета
достаточно широк — мутации, нарушения
транскрипции и трансляции, генетически
детерминированные дефекты мембран
клеток (болезнь Брутона, синдром Луи-
Бар, хронический гранулематоз, синдром
Ди Джорджи, швейцарская агаммаглобулинемия).

Вторичные
или приобретенные иммунодефициты
возникают
вследствие какого- либо тяжелого
заболевания (т.е. как правило при ранее
нормальном иммунном статусе).

Иммунодефицитное
состояние ― снижение
или полное отсутствие иммунного ответа,
обусловленное дефектом одного или
нескольких звеньев иммунной системы.

Классификация
иммунодефицитов

  1. Первичные врожденные
    — являются генетически детерминированными
    болезнями иммунной системы.

  2. Вторичные
    приобретенные — обусловлены поражением
    нормальной иммунной системы.

По пораженному
звену иммунной системы: 1) клеточные, 2)
гуморальные, 3)комбинированные.

Клеточные
иммунодефициты:недостаточность
Т-системы; недостаточность фагоцитоза.

Гуморальные
иммунодефициты:недостаточность
В-системы;недостаточность комплемента.

Причины развития
врожденных иммунодефицитов:удвоение
хромосом;точечные мутации;повреждения
генома в эмбриональном периоде;дефект
ферментов обмена нуклеиновых
кислот;генетически обусловленные
нарушения мембран ИКК.

Причины развития
приобретенных иммунодефицитных
состояний:перенесенные инфекции
(особенно вирусные);ожоговая
болезнь;уремия;опухоли;нарушения обмена
веществ;истощение;тяжелые травмы;хирургические
вмешательства;медикаментозные
воздействия;облучение;старение.

Моноклональные
антитела моноспецифичны и являются
исключительно удобным диагностическим
средством.

Ц. Мильштейн и
Г.Келер в 1975 г. разработали методику
получения моноклональных антител,
которые называют гибридомами
и по сути представляют собой бессмертные
клоны непрерывно делящихся В-клеток.
Получают гибридом путем слияния
нормальных по продолжительности
жизненного цикла лимфоцитов, продуцирующих
антитела, с опухолевыми (бессмертными)
дефектными линиями В-клеток, не способных
к секреции иммуноглобулинов.

Получены
гетерогибридомы (человеческая
антителообразующая клетка мышиная
опухолевая В-клетка). Они не вызывают
иммунной реакции при введении человеку.

Путем клонирования
гибридом можно получить набор
моноклональных антител фактически
против любых эпитопов определенного
иммуногена. С помощью гибридом можно
получить неограниченное количество
антител, которые сохраняют свою высокую
специфичность и чувствительность.

24. Классы иммуноглобулинов. Основные функции различных классов иммуногпобулинов, особенности строения.

В зависимости от
строения константных областей тяжелых
цепей все иммуноглобулины подразделяют
на пять классов:
IgG, IgE, IgD, IgM и IgA.

При этом в их
составе соответственно содержатся γ,
ε, δ, μ и α Н-цепи, χ или λ вариант L-цепей,
т. е. каждый класс иммуноглобулинов
представлен двумя типами молекул,
например IgGχ и IgGλ. и т. д.. Первые три
класса иммуноглобулинов IgG, IgE, IgD являются
мономерами и содержат два антигенсвязывающих
центра.

IgM – полимер, состоит из пяти
мономерных молекул, полимеризованных
(связанных) в области Fc-фрагментов
j-цепями. IgA в сыворотке крови, как и IgG,
– мономер, а в секретах слизистых
оболочек, межтканевой жидкости –
полимер, состоящий из двух мономерных
молекул IgAS, защищённый от воздействия
протеолитических ферментов особым
полипептидом (секреторным компонентом
Sc).

Функциональные значение иммуноглобулинов разных классов

Иммуноглобулины
класса М.
Содержатся в сыворотке крови. Синтезируются
при первичном попадании Аг в организм.
Пик образования приходится на 4-5 сутки.
Эти АТ низкоаффинны,
но высокоавидны
из-за большого числа активных центров.
Аффинность,
или аффинитет
(К-константа связывания) – это сила
связывания отдельной детерминанты
(эпитопа) антиген со специфическим к
нему активным центром (паратопом)
антитела. Авидность,
или авидитет
– это прочность связывания всей молекулы
иммуноглобулина с антигеном.

Образование IgМ
к некоторым антигенам (например, к
жгутиковым Аг бактерий) осуществляется
постоянно. К IgM
относится значительная часть АТ,
вырабатывающихся к Аг грамотрицательных
бактерий. Наличие IgM
к Аг конкретного возбудителя указывает
на острый инфекционый процесс. Т.к. эти
антитела состоят из 5 мономеров, их
молекула приобретает 10 Аг-связывающих
участков.

Иммуноглобины
класса G. У
человека являются наиболее важными.
Составляют основную массу иммуноглобулинов
сыворотки крови и до 75 % всех Ig.
Они неоднородны построению Fc-фрагмента,
в связи с этим различают их четыре
субкласса: G1,
G2,
G3,
G4.
В большом количестве появляются при
вторичном иммунном ответе.

Иммуноглобины
класса А. Делят
на 2 разновидности: сывороточные и
секреторные. Первые из них находятся в
крови (15-20 % всех Ig),
вторые — в различных секретах. Соответственно
этому сывороточный иммуноглобин А
принимает участие в общем, иммунитете,
а секреторный обеспечивает местный
иммунитете, создавая барьер на пути
проникновения инфекций и токсинов в
организм.

Секреторный
находится в наружных секретах — в слюне,
слизи трахеобронхиального дерева,
мочеполовых путей, молоке. Молекулы
иммуноглобина А, присутствующие во
внутренних секретах и жидкостях,
существенно отличаются от молекул
наружных секретов. Секреторный компонент,
по всей видимости, образуется в
эпителиальных клетках и в дальнейшем
присоединяется к молекуле IgA.

IgA нейтрализует
токсины и вызывает аглютинацию
микроорганизмов и вирусов. Содержание
IgA резко возрастает при заболеваниях
верхних дыхательных путей, пневмониях,
инфекционных заболеваниях желудочно-кишечного
тракта и др.

Иммуноглобины
класса Е.
Принимают участие в нейтрализации
токсинов, опсонизации, аглютинации и
бактериолизисе, осуществляемом
комплементом. К этому классу также
относятся некоторые природные антитела,
например к чужеродным эритроцитам.
Содержание IgE повышается при инфекционных
заболеваниях у взрослых и детей. Защитные
свойства направлены преимущественно
против гельминтов (нематод).

Иммуноглобины
класса D.
Представляют собой антитела, локализующиеся
в мембране плазматических клеток, в
сыворотке их концентрация невелика.
Служат рецептором В-лимфоцитов. Их
количество увеличивается при некоторых
вирусных заболеваниях. Предполагают,
что они участвуют в аутоиммунных
процессах.

У новорожденных
в крови имеется только материнский IgG
(8-10 г/л), уровень которого снижается к
5-6 месяцам (до 5 г/л). Количество IgA
и IgM
очень небольшое (0,02-0,1 г/л). К году их
уровень увеличивается. У 2-х-летних детей
уровень иммуноглобулинов близок к
нормам взрослых.

Кроме различных
классов иммуноглобулинов, между
молекулами АТ существуют аллотипические,
изотипические
и идиотипические
отличия.

Аллотипы
иммуноглобулинов – это вариации в их
строении у разных индивидуумов. Их
наличие обусловлено различиями небольших
аминокислотных последовательностей
константных участков тяжелых и легких
цепей в результате незначительного
полиморфизма генов, кодирующих их
синтез. Аллотипические различия не
влияют на функциональные свойства АТ.

Изотипы
иммуноглобулинов – молекулы
иммуноглобулинов, у которых константные
(С) домены тяжелых цепей генетически и
структурно различаются. Примеры – пять
классов иммуноглобулинов. Структурные
различия в составе цепей влияют на
функциональные свойства АТ.

Идиотипы
– совокупность антигенных детерминант
V-областей
антител. Идиотипические детерминанты
расположены в антигенсвязывающих
центрах. Все молекулы Ig, продуцируемые
отдельным лимфоцитом и его потомками
(т.е. клоном плазматических клеток),
несут один и тот же идиотип и обозначаются
термином «моноклональные
антитела».

прямой и
непрямой.

30. Серологический метод исследования: цели постановки, задачи, оценка. Диагностикумы.

Иммунологическая
реакция– это
взаимодействие антигена с антителом,
которое определяется специфическим
взаимодействием активных центров
антитела (паратопа) с эпитопами антигенов.

Общая классификация
иммунологических реакций:

  • серологические
    реакции

    реакции между антигенами (Aг)
    и антителами (Ig)
    invitro;

  • клеточные реакции
    с участием иммунокомпетентных клеток;

аллергические
пробы –
выявление гиперчувствительности.

а) для идентификации
антигена:

    • в патологическом
      материале (экспресс-диагностика);

    • в чистой культуре:

  1. серологическая
    идентификация (определение вида);

  2. серотипирование
    (определение серовара);

б) для выявления
антител (Ig):

    • наличия
      (качественные реакции);

    • количества
      (нарастание титра – метод «парных
      сывороток»).

а) простые (2-х
компонентные: Ag
Ig):

  • реакции агглютинации
    РА (с корпускулярным антигеном);

  • реакции преципитации
    РП (с растворимым антигеном);

б) сложные (3-х
компонентные: Ag
Ig
C);

в) с использованием
метки.

Реакции с
использованием метки:

  • РИФ – реакция
    иммунофлюоресценции;

  • ИФА – иммуноферментный
    анализ;

  • РИА – радиоиммунный
    анализ;

ИЭМ – иммунная
электронная микроскопия.

В РПГА выявляют
антитела сыворотки крови с помощью
антигенного эритроцитарного диагностикума,
который представляет собой эритроциты
с адсорбированными на них антигенами.
Эритроциты (или частицы латекса) с
адсорбированными на них антигенами
взаимодействуют с соответствующими
антителами сыворотки крови, что вызывает
склеивание и выпадение эритроцитов на
дно пробирки или ячейки в виде фестончатого
осадка.

Реакция
связывания комплемента (РСК) заключается
в том, что при соответствии друг другу
антигенов и антител они образуют иммунный
комплекс, к которому через Fc-фрагмент
антител присоединяется комплемент (С),
те происходит связывание комплемента
комплексом антиген — антитело. Если же
комплекс антиген — антитело не образуется,
то комплемент остается свободным.

РСК
проводят в две фазы 1 -я фаза — инкубация
смеси, содержащей антиген антитело
комплемент, 2-я фаза (индикаторная) —
выявление в смеси свободного комплемента
путем добавления к ней гемолитической
системы, состоящей из эритроцитов
барана, и гемолитической сыворотки,
содержащей антитела к ним.

В 1-й фазе
реакции при образовании комплекса
антиген — антитело происходит связывание
им комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз
сенсибилизированных антителами
эритроцитов не произойдет (реакция
положительная). Если антиген и антитело
не соответствуют друг другу (в исследуемом
образце нет антигена или антитела),
комплемент остается свободным и во 2-й
фазе присоединится к комплексу эритроцит
— антиэритроцитарное антитело, вызывая
гемолиз (реакция отрицательная).

ЛАБОРАТОРНЫЕ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ АЛЛЕРГИИ.

1)выявление свободных
антител в сыворотке крови и секретах.

2)
обнаружение антител, связанных с
лейкоцитами. Применяемые реакции: прямой
тест дегрануляции базофилов, реакция
аллергенспецифического повреждения
гранулоцитов, реакция выброса ионов К
и др;

3)
определение лимфоцитов, сенсибилизированных
к аллергену.

Проба
Манту

52.Активная
иммунопрофилактика. Вакцины, требования
предъявляемые к ним. Типы вакцин. Факторы,
оказывающие влияние на эффективность
поствакцинального иммунитета. Доза,
интервал конкуренция антигенов,
длительность антигенной стимуляции,
бустерный эффект.

Иммунопрофилактика
(ИП) — метод индивидуальной или массовой
защиты населения от инфекционных
заболеваний путем создания или усиления
искусственного иммунитета.

По характеру
действия на систему иммунитета ИП
бывает: специфическая, неспецифическая,
стимулирующая, подавляющая, активная,
пассивная.

Вакцины
– препараты для активной иммунопрофилактики
и имму­нотерапии. В зависимости от
количества антигенов, входящих в состав
вакцин, их подразделяют на моновакцины
и поливакцины.
Различают следующие типы вакцин.

А. Корпускулярные
вакцины
(цельноклеточные
и вирионные):

  • живые аттенуированные
    (ослабленные) вакцины

    – состоят из наследственно измененных
    форм м/о с ослабленной вирулентностью.
    Получают путем:

  • селекции штаммов
    с пониженной вирулентностью;

  • снижения
    вирулентности микроорганизмов при
    культивировании их в неблагоприятных
    условиях;

  • при пассировании
    через организм не­восприимчивых
    животных.

Примеры живых
аттенуированных: бруцеллезная,
туляремийная, чумная, сибиреязвенная,
туберкулезная вакцины, вакцины для
профилактики краснухи (Рудивакс), кори
(Рувакс), полиомиелита (Полио Сэбин
Веро), паротита (Имовакс Орейон).

  • убитые
    вакцины (инактивированные)

    – готовят из штаммов микроор­ганизмов
    с высокой иммуногенностью, которые
    инактивируют нагрева­нием,
    ультрафиолетовым облучением или
    химическими веществами. Примеры убитых
    вакцин – вакцины для профилактики
    сыпного тифа, лептоспирозная,
    тифопаратифозная, дизентерийная,
    холерная, антигриппозная вакцины;

  • аутовакцины
    – для приготовления используют культуру,
    выделенную от конкретно­го больного.

Б. Молекулярные
вакцины
(субклеточные,
субвирионные)
– содержат специфические антигены в
молекулярной форме, полученные путем
биологического синтеза, хими­ческим
путем или методом генетической инженерии.

К молекулярным
вакцинам относятся:

  • анатоксины:
    столбнячный, дифтерийный, стафилококковый,
    ботулинический и гангренозный. Их
    получают из истинных токсинов обработкой
    (по Рамону) 0,3-0,4% раствором фор­малина
    при t 40°С в течении 30-45 дней (4 недель).
    При обезвре­живании токсинов также
    используют различные окислители. Вместо
    анатоксиновможно
    применятьтоксоиды.
    Это продукты мутантных генов экзотоксинов,
    утратившие токсичность;

  • полные соматические
    и оболочечные
    протективные антигены
    ,
    выделяемые при химическом ращеплении
    бактерий или культивировании вакцинных
    штаммов (например, сибиреязвенных);

  • субъединичные
    вакцины
    из
    чистых гликопротеидов внешних оболочек
    вирусов (например, антигриппозные
    вакцины Инфлювак, Гриппол, Агриппал),
    получают, растворяя эти оболочки
    детергентами.

В. Ассоциированные
вакцины.
Для приготовления ассоциированных
вакцин обычно используют убитые микробы
или их компоненты. Наиболее известные
ассоциированные препараты: адсорбированная
коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина
(АКДС-вакцина), тетравакцина (вакцины
против брюшного тифа, паратифов А и В,
а также столбнячный анатоксин) и
АДС-вакцина (дифтерийно-столбнячный
анатокин), живая тривакцина (ослабленные
вирусы кори, эпидеического паратита и
краснухи).

К ассоциированным
вакцинам можно отнести коъюгированные
вакцины,
содержащие полисахариды (относятся к
Т-независимым антигенам) конъюгированные
с белковым носителем. Например, вакцина
против гемофильной типа b инфекции и
менингококковая вакцина группы С.

Г. Химические
(синтетические) вакцины –
содержат протективные антигены,
полученные путем химического синтеза,
и активатор-адъевант.

Для синтеза аналога
природного антигена (эпитопа) необходимо:

  • выделить биологически
    активный антиген и расшифровать его
    моле­кулярную структуру;

  • химическим или
    генно-инженерным путем синтезировать
    его аналоги;

  • сконструировать
    на основе этих антигенов химическую
    вакцину.

Активатор-адъювант
неспецифически усиливает иммуногенность
антигена, изменяет его физико-химическое
состояние, медленно вса­сываясь,
создает депо препарата на месте введения.
Вакцины с адъювантом называются
адъювантными,или
адсорбированными,депонированными.

Примеры синтетических
вакцин: антигриппозная, антисальмонелезная
и противоящурная.

Перечисленные
выше типы вакцин являются традиционными.
Ниже приведены вакцины
нового типа.

Д.
Генно-инженерные вакцинысодержат Аг
возбудителей, полученные с использованием
методов генной инженерии, и включают
только высокоиммуногенные компоненты.
Возможны несколько вариантов создания
генно-инженерных вакцин:

  • внесение генов
    вирулентности в авирулентные или
    слабовирулентные микроорганизмы;

  • внесение генов
    вирулентности в неродственные
    микроорганизмы с последующим выделением
    Аг и его использованием в качестве
    иммуногена;

  • искусственное
    удаление генов вирулентности и
    использование модифицированных
    организмов в виде корпускулярных
    вакцин.

Примеры
генно-инженерных вакцин: служат вакцина
против гепатита В (энджерикс), сифилиса,
холеры, бруцеллёза, гриппа, бешенства;
гликопротеины вирусов простого герпеса
и везикулярного стоматита

Е. Живые
аттенуированные вакцины с реконструированным
геном
готовятся путем «расчленения» генома
микроорганизма на отдельные гены с его
последующей реконструкцией, в процессе
которой ген вирулентности исключается
или заменяется мутантным геном, утратившим
способность детерминировать факторы
болезнетворности.

Ж. Антиидиотипические
вакцины –
вакцины на основе антиидиотипических
антител. Это вакцины без антигена. Это
объясня­ется структурным сходством
между эпитопом антигена и активным
центром антиидиотипического антитела
к данному антигену. Например, антитела
к рецептору СД4 ВИЧ, вве­денные в
организм, способствуют выработке
антиидиотипических ан­тител,
иммитирующих по структуре СД4 и способны
связать свободно-циркулирующий ВИЧ.

Для получения
антиидиотипических вакцин используют
гибридомы, отобранные после иммунизации
животных моноклональными антителами.

З. ДНК-вакцины
– особый тип новых вакцин из фрагментов
бактериальных ДНК и плазмид, содержащих
гены протективных антигенов, которые,
находясь в цитоплазме клеток организма
человека, способны в течение нескольких
недель и даже месяцев синтезировать их
эпитопы и вызывать иммунный ответ.

Функциональные значение иммуноглобулинов разных классов

по Оухтерлони,
радиальная иммунодиффузия в агаре по
Манчини, иммуноэллектрофорез).

а) с растворимым
антигеном:

  • объемная (например,
    реакция кольцепреципитации);

  • в геле (иммунодиффузия):

  1. простая (по
    Манчини);

  2. двойная или
    встречная (по Оухтерлони);

  • реакция нейтрализации
    токсина антитоксином (РН) (например
    реакция флокулляции);

  • другие варианты:

    1. иммуноэлектрофорез;

    иммуноблотинг.

    Реакция
    преципитации

    — РП (от лат praecipilo
    осаждать) — это формирование и осаждение
    комплекса растворимого молекулярного
    антигена с антителами в виде помутнения,
    называемого преципитатом. Он образуется
    при смешивании антигенов и антител в
    эквивалентных количествах, избыток
    одного из них снижает уровень образования
    иммунного комплекса.

    Реакцию
    преципитации

    ставят в пробирках (реакция
    кольцепреципитации), в гелях, питательных
    средах и др. Широкое распространение
    получили разновидности реакции
    преципитации в полужидком геле агара
    или агарозы двойная иммунодиффузия по
    Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия,
    иммуноэпектрофорез и др.

    Реакция
    кольцепреципитации.

    Реакцию проводят в узких преципитационных
    пробирках: на иммунную сыворотку
    наслаивают растворимый антиген. При
    оптимальном соотношении антигена и
    антител на границе этих двух растворов
    образуется непрозрачное кольцо
    преципитата.

    Реакция
    двойной иммунофиффузиии по Оухтерлони.
    для
    постановки реакции растопленный агаровый
    гель тонким слоем выливают на стеклянную
    пластинку и после затвердевания в нем
    вырезают лунки. В лунки геля раздельно
    помещают антигены и иммунные сыворотки,
    которые диффундируют навстречу друг
    другу. В месте встречи в эквивалентных
    соотношениях они образуют преципитат
    в виде белой полосы. У многокомпонентных
    систем между лунками с антигенами и
    антителами появляется несколько линий
    преципитата; у идентичных АГ линии
    преципитата сливаются; у неидентичных
    АГ — . пересекаются.

    Реакция
    радиальной иммунодиффузии.

    Иммунную сыворотку с расплавленным
    агаровым гелем равномерно наливают на
    стекло. После застывания в геле делают
    лунки, в которые помещают антиген в
    различных разведениях. Антиген,
    диффундируя в гель, образует с антителами
    кольцевые зоны преципитации вокруг
    лунок. Диаметр кольца преципитации
    пропорционален концентрации антигена.
    Реакцию используют для определения в
    сыворотке крови иммуноглобулинов
    различных классов, компонентов системы
    комплемента и др. Иммуноэлектрофорез
    — сочетание метода электрофореза и
    иммунопреципитации: смесь антигенов
    вносится в лунки геля и разделяется в
    геле с помощью электрофореза, затем в
    канавку параллельно ) зонам электрофореза
    вносят иммуннук сыворотку, антитела
    которой диффундируют в гель и образуют
    в месте «встречи» с антигеном линии
    преципитации.

  • прямой и
    непрямой.

    Проба
    Манту

    39. Иммуноферментный анализ. Варианты постановки.

    I
    Радиоиммунный анализ.

    Радиоиммунный
    метод, или анализ (РИА), — высокочувствительный
    метод, основанный на реакции антиген —
    антитело с применением антигенов или
    антител, меченных радионуклидом (125J,
    14С, ЗН, 51Сг и др.). После их взаимодействия
    отделяют образовавшийся радиоактивный
    иммунный комплекс и определяют его
    радиоактивность в соответствующем
    счетчике (бета- или гамма-излучение).
    Интенсивность излучения прямо
    пропорциональна количеству связавшихся
    молекул антигена и антител.

    Иммуиоферментный
    анализ, или метод (ИФА) — выявление
    антигенов с помощью соответствующих
    им антител, конъюгированных с
    ферментом-меткой (пероксидазой хрена,
    бета-галактозидазной и или щелочной
    фосфатазой). После соединения антигена
    с меченой ферментом иммунной сывороткой
    в смесь добавляют субстрат/хромоген.

    Субстрат расщепляется ферментом и
    изменяется цвет продукта реакции —
    интенсивность окраски прямо пропорциональна
    количеству связавшихся молекул антигена
    и антител. ИФА применяют для диагностики
    вирусных, бактериальных и паразитарных
    болезней, в частности для диагностики
    сальмонеллеза, микоплазмозов и др.

    , а
    также определения гормонов, ферментов,
    лекарственных препаратов и других
    биологически активных веществ,
    содержащихся в исследуемом материале
    в минорных концентрациях-1010 -1012 г/л.
    Твердофазный ИФА — вариант теста, когда
    один из компонентов иммунной -реакции
    (антиген или антитело) сорбирован на
    твердом носителе, напр.

    добавляют сыворотку
    крови больного, антиглобулиновую
    сыворотку, меченную ферментом и
    субстрат/хромоген для фермента.

    Оцените статью